实验原理：

铜离子（Cu²⁺）在碱性条件下能与化合物中两个或以上肽键（-CO-NH-）形成紫色络合物；NaOH溶液通过提供碱性环境确保肽键的氮原子去质子化，形成配位活性位点；这一反应基于肽键与双缩脲（两分子尿素缩合产物）的类似结构，因此得名“双缩脲反应”。

实验试剂：

鸡蛋清，NaOH，CuSO4

实验分组：

A. 空白（-）对照

B. 2ml 鸡蛋清 (+)对照

C. 2ml 鸡蛋清（60℃水浴加热5min后加入氢氧化钠）

D. 2ml 鸡蛋清（先加入氢氧化钠再60℃水浴加热5min）

实验流程：

1. 配置0.1g/ml NaOH溶液，0.01g/ml CuSO4各10ml

2. 实验分组A和B在2ml组织样液中滴加1m NaOH, 再滴4滴CuSO4, 震荡混匀

3.实验组C和D探究加热对反应的影响；实验组C60℃水浴加热5min后滴加氢氧化钠和硫酸铜；实验组D先加入氢氧化钠再60℃水浴加热5min，加热完成后滴加硫酸铜

实验结果

60℃水浴加热5分钟无法使酰胺键彻底断裂，因此C和D仍然有紫色络合物产生；同时碱性条件下加热会使蛋白质变性和水解加快，增加了肽键的暴露，从而使反应物颜色更深

Figure.不同条件下鸡蛋清加入双缩脲试剂后产生的颜色变化